Etapas simples para fazer tampão de citrato de sódio

Em seis etapas fáceis, saiba como fazer o buffer de citrato de sódio. Citrato de sódio ou citrato trissódico podem solucionar soluções na faixa de pH de cerca de 3 a 6. 2. O ácido cítrico também pode fazer o trabalho.

O tampão de citrato de sódio é utilizado para o isolamento de RNA porque minimiza a hidrólise da base das cadeias de ARN. Isso torna um passo importante na purificação do ARNm durante a pesquisa genômica ou para o estudo da transcrição.

Os tampões à base de citrato também podem auxiliar a detecção de antígenos em preparações de tecidos fixas porque quebram as ligações cruzadas formadas entre os antígenos e os meios de fixação.

Com o guia abaixo, faça um tampão de citrato de sódio de pH 6. As instruções não são apenas fáceis, mas rápidas de executar também. Deve levar apenas cerca de 10 minutos para concluir estas etapas.

Duas opções para fazer o buffer

Existem duas maneiras de fazer um buffer de citrato de sódio. Primeiro, determine se você tem ácido cítrico e base conjugada, citrato de sódio, para trabalhar. Se você só tem ácido cítrico, não é um problema. Você ainda pode fazer o buffer.

Por outro lado, se você tem ácido e base, crie uma solução de estoque de cada um. Misture 21 gramas de ácido cítrico em 1 litro de água destilada e 29. 4 gramas de citrato de sódio em 1 litro de água destilada.

Se você tiver apenas ácido cítrico, misture 2. 1 gramas em pouco menos de 1 litro de água destilada e vá para o próximo passo.

Soluções de Mistura de ácido cítrico e Citrato de sódio

Agora que você criou sua solução de estoque (se você tivesse um ácido e uma base) ou misturou seu ácido em água destilada (se não o fez), você pode Concentre-se em suas soluções.

Misture 82 mililitros da solução de ácido cítrico com 18 mililitros de solução de citrato de sódio.

Em seguida, faça o volume total da mistura até pouco mais de 1 litro com água destilada. Deixe um volume suficiente para permitir a adição de hidróxido de sódio (NaOH) no próximo passo.

Ajustando o pH

Ao mexer suavemente a solução usando um agitador magnético, use hidróxido de sódio 1M para ajustar o pH da mistura para 6. 0. Depois disso, faça o volume final da solução até 1 litro com água destilada usando um balão volumétrico.

O que você precisa para fazer o buffer

Não só não demorará muito para fazer o buffer de citrato de sódio, também não precisará de muitos materiais para isso. Com ácido cítrico, 1M de hidróxido de sódio, água destilada e uma sonda de pH calibrada, você estará a meio caminho. O uso de citrato de sódio é opcional.

Fazer o buffer também exigirá um cilindro graduado de 1 litro, um balão volumétrico de 1 litro e três garrafas de mídia de 1 litro. Por fim, você precisará de uma barra de agitação magnética e de um agitador magnético.

Se você não possui todos esses materiais, considere usar o laboratório em sua escola ou local de trabalho, então você não precisa comprá-los. Você também pode facilmente comprar esses materiais on-line ou visitar uma loja de especialidades em sua área.